HPLC用色譜柱。每一根色譜柱在出廠前，都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測，產(chǎn)品保持同一品質(zhì)，用戶可以安心使用。
一、使用前的檢查和須知事項(xiàng)
? 檢查包裝箱的外觀是否完整、有無碰撞損壞痕跡;
? 打開包裝,檢查色譜柱的填料名稱、規(guī)格尺寸、連接型式是否相符;
? 每根色譜柱均附有相應(yīng)出廠檢驗(yàn)報(bào)告，報(bào)告.上記載了序列號(hào)、產(chǎn)品編號(hào)、填料批號(hào)、柱性能、測試色譜條件等內(nèi)容，閱讀后請(qǐng)妥善保管。
二、色譜柱在使用過程中的注意事項(xiàng)
無特殊說明情況下，本公司色譜柱通常保存于下表流動(dòng)相中。用戶使用前，一定要注意色譜柱評(píng)價(jià)流動(dòng)相與分析樣品實(shí)際使用流動(dòng)相互溶。
2條件，一定要用某中介流動(dòng)相(如異丙醇)珞換掉柱內(nèi)的流動(dòng)相，然后再使用反相流動(dòng)相; C18固定相采用甲醇/水或乙腈/水為評(píng)價(jià)流動(dòng)相，若要使用含鹽濃度較高的流動(dòng)相，使用前請(qǐng)用有機(jī)溶劑含量較低的溶劑(如5-15%的甲醇或乙腈水溶液)替換原來的評(píng)價(jià)流動(dòng)相。色譜柱內(nèi)溶劑不互溶或鹽沉淀等現(xiàn)象會(huì)對(duì)柱性能造成極大傷害，明顯地減少柱壽命。第1次使用，建議先用保存流動(dòng)相低流速(0.2ml/min) 沖洗1-2個(gè)柱體積，再換用測試流動(dòng)相，這樣可以保護(hù)柱床，延長柱壽命。
? 色譜柱的安裝
色譜柱在運(yùn)輸過程中或在沒有使用時(shí)，它的兩端總是用堵頭進(jìn)行密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí)，首先移去兩端的堵頭。請(qǐng)注意將流動(dòng)相流動(dòng)的方向與柱上標(biāo)記的方向保持一致。除非出于特殊考慮，例如為了清理堵在色譜柱入口端的臟污等而需要將色譜柱反接以進(jìn)行沖洗時(shí)，建議用戶在接上色譜柱時(shí)一定要遵循柱上標(biāo)記的方向，雙向混用容易導(dǎo)致兩端填料同時(shí)污染，不利于再生和維護(hù)。
? 樣品與流動(dòng)相
樣品中雜質(zhì)是造成色譜柱污染、柱效下降的主要原因之一，復(fù)雜樣品可選用樣品過濾器或樣品預(yù)處理柱(SPE柱)對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，一定要保證樣品不含有微粒雜質(zhì)。若樣品不便處理，要使用保護(hù)柱。有時(shí)樣品溶劑與流動(dòng)相不匹配(不互溶、極性差異等)會(huì)導(dǎo)致色譜峰形變差、出現(xiàn)鬼峰等現(xiàn)象，建議盡可能采用流動(dòng)相溶解樣品。
流動(dòng)相所用的各種溶劑至少應(yīng)是分析純，盡可能使用色譜純?cè)噭鲃?dòng)相用水zui好是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。使用前zui好使用溶劑過濾器過濾除去可能存在的微粒。流動(dòng)相應(yīng)該現(xiàn)用現(xiàn)配，對(duì)于含鹽的溶液尤其應(yīng)該注意長時(shí)間放路會(huì)產(chǎn)生**或出現(xiàn)沉淀。保證儲(chǔ)存流動(dòng)相的溶劑瓶清潔。
三、色譜柱的保養(yǎng)
? PH
常規(guī)硅膠基質(zhì)鍵合相填料高效液相色譜柱pH值適用范圍是2.0~7.0，當(dāng)必須在pH值使用范圍邊界條件使用高效液相色譜柱時(shí)，一定要注意每次使用結(jié)束后立即用適合于色譜柱儲(chǔ)存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑徹底清洗路換流動(dòng)相。
? 壓力
盡管5000 psi的壓力下使用，但正常的操作壓力應(yīng)當(dāng)?shù)陀?/span>3000 psi。長時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)損壞色譜柱和輸液泵。由于壓力來源于流速，因此zui大流速將受制于系統(tǒng)所能承受的壓力。一般而言，柱壓會(huì)隨著色譜柱使用時(shí)間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預(yù)示色譜柱入口端的篩板發(fā)生了堵塞。在這種情況下，建議將色譜柱反接后用適宜的溶劑進(jìn)行沖洗。
? 溫度
zui高操作溫度為60C。長時(shí)間在高溫(>75'C) 下操作也會(huì)損壞色譜柱，這種情形在高的pH (>8) 條件下特別突出。
? 儲(chǔ)存
1)短時(shí)間或過夜儲(chǔ)存:使用緩沖溶液或含鹽流動(dòng)相時(shí)，需要用適當(dāng)?shù)娜軇⑸V柱和系統(tǒng)內(nèi)流動(dòng)相珞換，反相色譜柱儲(chǔ)存溶劑中有機(jī)溶劑濃度zui好不要低于20%。
2)長時(shí)間儲(chǔ)存:存儲(chǔ)之前色譜柱一定要仔細(xì)清洗,避免殘留樣品雜質(zhì)。反相柱可以用純甲醇或乙腈，正相柱可以用純正已烷。為了防止柱床干涸，請(qǐng)用堵頭塞緊色譜柱的兩端。存儲(chǔ)溫度zui好是室溫狀態(tài)。
四、色譜柱的再生
高效液相色譜柱是消耗品，會(huì)隨使用時(shí)間或進(jìn)樣次數(shù)的增加，出現(xiàn)色譜峰高降低，峰寬加大或出現(xiàn)肩峰，一般來說可能是柱效下降。需要定期進(jìn)行徹底清洗和再生處理。
? 反相色譜柱
取下色譜柱，重新連接到色譜儀上，讓流動(dòng)相反方向流過色譜柱，流速為通常使用正常流速的一半。依次使用5~10%的甲醇或乙腈、甲醇或乙腈、異丙醇、二氯甲烷、正已烷、二氣甲烷、異丙醇、甲醇或乙腈沖洗色譜柱，每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱不少于20個(gè)柱體積，再按正確的流動(dòng)方向，把色譜柱重新連接到色譜上，重新平衡后檢查性能是否恢復(fù)。注意:由于異丙醇的粘度大，建議注意根據(jù)柱壓力變化作調(diào)整，如將流速降到0.1-0.3ml-min。
? 正相色譜柱
取下色譜柱，重新連接到色譜儀上，讓流動(dòng)相反方向流過色譜柱，流速為通常使用正常流速的一半。依次使用50:50 (v/v)甲醇:氯仿溶液、乙酸乙酯沖洗色譜柱，再按正確流動(dòng)方向，把色譜柱重新連接到色譜上，用流動(dòng)相平衡后檢查性能是否恢復(fù)。
